常见问题
Fibro采用衍生的静电纺丝纤维素为基质,开放结构允许对流流速并将目标蛋白直接传质到固定在纤维表面上的配体,保留时间以秒计算;基质机械强度高,耐受高流速;较大的表面积,实现高结合力;而普通的树脂色谱,传质受限于分子在填料颗粒中缓慢的扩散,工艺流速受限于颗粒硬度,保留时间需几分钟。由此,mAb纯化速度,Fibro比传统层析快~20倍。同时,Fibro通过单点偶联PrismA配基,高载量、高耐碱(最高达2 M NaOH)和蛋白酶稳定性,每个Cycle后建议均进行CIP。
针对小型生产规模和灵活高通量设置的需求,开发了即用型Fibro PrismA单元,来捕获单抗、双抗、Fc融合蛋白以及VH3抗体片段。
总体上,抗体收获液需要经过初步离心之后,再经过深层过滤处理(Pall, PDE2),然后经过 0.2 µm 过滤。也可以通过粗深层过滤(Pall,PDP8)去除细胞碎片,然后经过精细的深层过滤(Pall, PDE2),最后再经过 0.2 µm 过滤;深层过滤可以有效去除过程中产生的杂质,从而避免 Fibro 基质污染。
收获液应该尽快经过澄清处理,澄清后进行冻存,然后再次解冻后,在上样前经过 0.2 µm 过滤。
Fibro 层析技术应用于生产阶段可以带来灵活性。在大生产规模可以选择快速层析技术来缩短处理时间,这可以为其他操作节省时间。另外,你也可以通过单个批次使用 Fibro 的全生命周期,从而减少消耗品的消耗和成本,在临床阶段可以带来显著的成本节省,在商业化生产阶段,可以减少不同批次间的 change over 时间。