常见问题
- 默认保存位置：手动运行结果，系统默认保存在“用户名”对应的 Home 文件夹的下一级仪器型号子文件里。例如，以用户名 Default 登陆 UNICORN™，该UNICORN™软件下配置有 2 台 ÄKTA 仪器，分别是 Avant 150 和 Avant 25。那么，在 Avant 150设备上手动运行的结果，默认保存在 DefaultHome 文件夹的下一级子文件夹 Avant 150（Manual）中；在 Avant 25 设备上手动运行的结果，默认保存在 DefaultHome 文件夹的下一级子文件夹 Avant 25（Manual）中，如图1所示。
注意：默认保存，最多只保留 10 个手动运行结果，第 11 个手动运行结果，如果默认保存，就会自动覆盖第 1 个手动运行的结果 Manual run 001，以此类推。
图 1 手动运行结果的默认保存位置
- 另存为：用户可以以“另存为”的方式，自主选择或新建手动运行结果的保存文件夹，并自定义文件名。设置方法：在 System Control 界面，点击 Manual → Execute Manual Instructions，弹出 Manual Instructions 窗格，在 Save Result as → Browse... 按钮，自主选择保存结果的文件夹并自定义文件名，如图 2 所示。
注意：另存为方式保存的结果，无论累积保存多少结果文件，都不会自动覆盖前面任何的结果文件。
图 2 手动运行结果的另存为保存方式
安装的每台设备，都有一组默认的参数值，System Settings 中定义的参数值，即为系统的默认参数值。通过 System Control 模块中的 System Settings 对话框，可以在实验运行前，对当前所选设备的系统默认参数值，进行查看和编辑，设置新的默认值。
而在 System Control 模块中的 Manual Instructions 对话框中，手动更改当前运行实验的参数值，则这种改变只影响当前实验的运行。
System Settings 中罗列的一些指令，也可用作方法和手动操作。当实验开始运行，System Settings 中的参数值，即为有效值。若在实验运行时，相同的指令是通过 Method Editor 或 Manual Instructions 手动操作执行的，则新设置的参数值，即为有效值。因此，系统所应用的参数值始终对应着最后一次被操作设置的参数值。当实验运行结束，运行的参数值将重新恢复到 System Settings 状态下的默认值。
打开UNICORN™ 软件的 System Control 窗口，通过点击工具栏中 Pause 和 Hold 来控制仪器运行。
Hold：暂停当前方法的继续执行，保持当前阶段的状态，液体仍继续以当前流速和缓冲液比例输送而不停止。
Pause：暂停当前方法的执行并停止所有泵，不再有液体输送。
Hold 命令只在方法运行时才可以使用，手动运行时该命令无法使用。Pause 命令在手动模式或者运行方法时皆可使用。
若 System Control 整个窗口为灰色状态，首先检查 UNICORN™ 软件和 ÄKTA™ 设备是否正常连接，若连接正常但 Run Data、Chromatogram、Process Picture、Run Log 没有显示，检查方法如下：
- 点击 Connect to Systems 图标，确认勾选设备，点选 Control，并点击 OK。
图 1连接系统
- 点击 View 下拉菜单，将 Run Data、Chromatogram、Process Picture、Run Log 全部勾选，即显示各窗格信息。
图 2 窗口显示设置
当 System state 不是 Ready 状态时，Calibrate... 按钮是灰色的，此时不能进行校准操作。只有当设备状态处于 Ready 时，才可以进行校正操作。
仪器处于运行状态时无法使用导航栏中 System → Settings 进行系统设置更改。如需更改参数设置须系统处于 Ready 状态，如图1所示，在 System Control 界面左下角显示。
图 1 系统处于“Ready”状态
System Control 窗口的 View 下拉菜单把 Process Picture 勾选后，则窗口出现系统流路图，流路图中显示设备中的各个模块和阀门的图标，通过管路连接。点击图标可以设置模块的参数和阀门的状态，一旦设置流速，液体在设备管路中流动，液体流经流路和方向也会在流路图中显示绿色。ÄKTA™ 操作者可以通过流程图来控制系统，根据液体的流向从入口阀到收集器，可以点击图标来设置以下一些功能：
- 点击入口阀图标控制入口的管路选择，默认为 A1 和 B1，直接点击 A1-A7、B1-B7 即可更改入口管道。
图 1缓冲液入口阀入口选择
- 点击 A、B 泵图标可以设置流速 System flow，AB 泵的比例 Conc % B（默认为0），和泵洗的入口 Start pump A wash，系统清洗和清洗液排废的出口和体积 Start system wash，其中System out(W) 为从入口管道到层析柱后收集器前出口阀全部清洗，Injection valve(W1) 为从入口管道到层析柱前进样阀全部清洗。
图 2 系统泵流速选择
- 点击进样阀可以设置进样阀的六种状态。默认 Manual load 为 A、B泵吸取液体进入层析柱，常用的模式有两个，Inject 为样品环上样，System pump waste 为 AB泵吸取的液体进入废液管道W1。
图 3 进样阀流路选择
- 点击柱位阀图标可设置对应柱位的层析柱连入系统，默认是 By-pass 旁路，液体可以选择正向 Down flow 或反向 Up flow 流入柱子。
图 4 柱位阀流路选择
- 点击UV图标可以设置 UV 归零 Auto zero，设置的 UV 波长吸收数值则立即自动归零。
图 5 UV归零
- 点击 Restrictor 图标可以设置限流器和pH电极的接入情况。默认为 Restrictor 为仅接入限流器，pH only 为仅接入 pH 电极，By-pass both 为两者都不接，Restrictor and pH 为两者同时连入系统。
图 6 pH阀流路选择
- 点击 Outlet valve 可以设置液体的排出选择，默认为 Waste 流入废液管路，Frac 流入收集器废液通道，Out1-10 流入对应的大体积收集瓶。
图 7 出口阀流路选择
- 点击收集器图标可以设置收集器的参数，例如 F9-T双板收集器的常用的设置有：Set Type 为设置放入的收集板类型如96、24、48孔板，0.5 ml板等，First available position 设置开始收集的第一管位置，Fraction Volume 设置每管收集体积，Start 启动收集，Stop 停止收集。
图 8 收集器设置
冲洗体积和流速都可进行更改（建议使用默认参数），对于ÄKTA™ 25的系统，默认冲洗体积为15 ml（可更改的范围为5-999 ml），默认冲洗流速为20 ml/min （可设置流速范围为0-25 ml/min），对于ÄKTA™ 150系统，默认冲洗体积为80 ml（可更改的范围为5-999 ml），默认冲洗流速为75 ml/min （可设置流速范围为0-150 ml/min）。
更改默认冲洗流速/体积路径：System → Settings… → Advanced → System and pump wash settings → System flow rate/ System pump wash volume
图 1更改系统冲洗默认参数
首先确定仪器配备的是多波长U9-M还是单波长U9-L，U9-L无法更换波长，可以监测280 nm的光吸收值。U9-M可以更换波长，波长可选范围是190-700 nm。具体操作：
如果是手动操作，按以下路径执行：System Control → Manual → Execute Manual Instructions… → Monitors → Wavelength 右侧框中有默认的波长，需要改动的话点击 Off，再在框中输入想要检测的波长即可。
图1. 手动操作中更换监测波长
在 System Settings 里也可以进行波长设置，System Control → System-Settings… → UV → wavelength → System Settings 里的设置会改变系统的参数，而不是改变本次实验参数。
图2. System Settings中更换监测波长
在手动运行的过程中，我们可以快速进行洗脱梯度的设置。打开 Manual Instructions → Pumps and pressures → Gradient ，更改 Target， Length参数。
图1 手动洗脱梯度设置
System Control → System → Running Methods → Cancel Method，再重新运行 Method Queue 。具体步骤如下图所示（注意此操作会删除整个 Method Queue，无法单独取消某一个 Method）。
图 1删除正在运行的 Method Queue
可以，在 System Control 窗口 Manual → Execute Manual Instructions… 插入需要调整的参数即可。
说明：大部分参数仅针对当前phase，在跳转到下一个phase需要再次确认。（举例：调整流速，只对当前phase有用，跳转到下个phase恢复到原方法中设置的流速）