常见问题

侧向流:样品垫、结合物释放垫、NC膜、吸水垫

渗滤:NC膜、吸水垫

干化学:棉纤维素膜,如CF系列

柱式核酸提取:玻璃纤维膜,如GF系列

新生儿采血:903采血卡、CF12

样品垫:根据膜材性质,包括材质(玻纤、棉纤),厚度、克重、吸水速率及样本类型(水洗样本、血液样本等),如GF/DVA、Fusion5、MF1等

结合物释放垫:玻璃纤维材质,考核其厚度、克重、吸水速率、胶金释放效率等,如AccuflowG、33glass等

NC膜:考核孔径大小、毛细管爬速、厚度、表活含量等,如FFHP系列。

吸水垫:选择吸水量较大且保水能力强的棉纤,如CF系列。

Whatman可以提供特殊的全血分离膜作为样品垫,如LF1 MF1 Fusion5 VF2

胶金释放效率非常高,如Fusion5的释放效率高达90%以上。

  1. AE系列是没有背衬的。它们可以用于侧向流或渗滤检测法。由100%的硝酸纤维素构成,未进行后处理。
  2. FF膜是AE膜系列的一个成员,通过直接浇注于塑料薄膜而制成。这种塑料浇注的薄膜对于要求具有更快爬速的侧向流测试是理想的选择。
    1. FFHP:是表面活性剂含量最低的膜,表活处理方式为预处理。厚度为200 um(含背衬)。这种膜现有 3 种吸水速率并直接成形于塑料背衬上,提供非常好的灵敏度和一致性。适合进行量化分析或通过减少试剂分配来降低成本。FFHP 膜毛细爬升变异系数 (CV) 小于 10%,具有很低的批内和批间差。
    2. FFHP Plus:在FFxxHP的基础上改造而来,加入了增强型的表面活性剂克服了疏水问题,具有更好的表面性能。使侧向流实验的优化变得更加高效和简单。厚度为200 μm(含背衬)。适用于粘稠样品或希望降低试剂分配从而节省成本的情况。
    3. FFHP Plus Thick:更厚,为235 μm(含背衬),且更高的表面活性剂含量,表面亲水性更高。表活处理方式为预处理,提供非常好的灵敏度和一致性。
  3. Immunopore 膜是表活含量最高的膜,且所使用的表面活性剂非常独特。表活处理方式为后处理。该膜是直接浇注在背衬上,现有 4 种吸水速率,提供非常好的灵敏度和一致性。对于一些苛刻的实验,对检测的重复性,稳定度和精确性要求极高的实验,如传染疾病检测,Immunopore系列能提供最满意的解决方案。
  4. Prima 膜是另一种可用的带背衬膜。提供更快的吸水速率,适合于更快的检测。但其最终的灵敏度不如Immunopore。Prima 为想要最快速的得到结果或者那些正在进行高粘度或含有高颗粒的样品检测提供了一种简单的解决方案。
  5. BA系列膜是小孔径的膜,通常为0.2、0.45微米,蛋白载量非常高,适用于免疫渗滤平台。

NC膜和吸水垫一般不需要预处理,样品垫和结合物释放垫通常根据项目情况进行适当的预处理。

储存条件:NC膜、玻纤和棉纤都应储存在常温干燥环境中,通常置于铝膜袋中,加入干燥剂,密封保存。

保质期:AE系列的NC膜保质期6个月,其他系列NC膜保质期2年;玻纤和棉纤推荐使用期5年。

将NC膜横向切下5cm,在4cm处做标记,宽1cm,置于特定的爬速仪上,并加入100微升去离子水,计算水在膜上爬升4cm所需要的时间,即为NC的毛细爬速。

  1. 注意操作规范,检查划膜步骤
  2. 划膜前,NC需在室温、40-60%湿度条件下平衡一定时间
  3. 调整划膜仪参数:划膜速度、针头对膜的压力
  4. 减少包被液的喷量,提高蛋白浓度
  5. 优化包被稀释液成分:离子种类及强度、pH、糖类浓度、表活种类及浓度、甲醇含量
  6. 尝试不同爬速的NC膜

NC膜关键影响因素在于其孔径大小,孔径不仅决定了爬速,而且决定了膜的内表面积,进而影响蛋白结合能力;另外,NC的表活含量也会影响其灵敏度。

根据核酸分子的大小,主要考量膜的厚度、核酸载量、澄清度、核酸回收率等。Whatman GF系列玻纤非常适合核酸提取。

推荐使用Whatman的3MM31ET,纯棉纤维素材质。