作者:Liu et al.
发表日期:2022年5月
发表期刊:Sci. Transl. Med.
研究背景
新型冠状病毒肺炎 (COVID-19) 是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的传染病,与2003年爆发的由SARS-CoV引发的非典型肺炎类似,具有极强的传播性。SARS-CoV和SARS-CoV-2均属于沙贝病毒(Sarbecoviruses),近年来不断的有新的沙贝病毒出现,预防或迅速控制未来由类似病毒引发的急性呼吸道传染病,对世界各国的社会稳定和经济发展都具有重要的意义。
本文作者研究鉴定了从先前感染过 SARS-CoV-2 的个体中分离出的人类单克隆抗体 10-40,该抗体可以广泛中和 SARS-CoV-2、SARS-CoV 和其他冠状病毒的几种变体。
实验方法
作者首先进行载体构建,PEI共转到293细胞中进行扩大培养。诱导表达之后收获上清,接着通过亲和层析和凝胶过滤层析,制备冷冻电镜样品。
该纯化过程具体如下:
- 第一步,载体构建及细胞稳转扩大培养。
- 第二步,亲和纯化,使用Ni-NTA IMAC Sepharose 6 Fast Flow亲和捕获。
- 第三步,使用Superdex 200精纯,样品保存在20 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 8.0中。
产品信息
类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
---|---|---|---|
填料 | 17531806 | Ni Sepharose 6 Fast Flow | 5 mL |
预装柱 | 28990944 | Superdex 200 Increase 10/300 GL | 1x 24 mL |