作者：Dan Liu
发表日期：2020年11月
发表期刊：Biosens Bioelectron
研究背景
2019 年新型冠状病毒病 (COVID-19) 是一种高度传染性的严重急性呼吸系统综合症，由严重急性呼吸系统综合症冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) 引起的人际传播，演变为全球大流行。虽然两年多过去了，但情况并没有好转，变异病毒在世界各地兴起。SARS-CoV-2 的结构蛋白包括刺突蛋白（S）、核衣壳蛋白（N）、包膜蛋白（E）和膜蛋白(M)。其中，S蛋白存在于病毒颗粒表面，与COVID-19的感染能力和发病机制密切相关。在这里，作者开发了一种新型的基于纳米酶的化学发光纸测定法，用于快速灵敏地检测 SARS-CoV-2 刺突抗原，该方法将纳米酶和酶化学发光免疫测定与横向流动条相结合。论文测试的核心是一种强大的 Co-Fe@hemin-过氧化物酶纳米酶，它催化化学发光的能力与天然过氧化物酶 HRP 相当，从而放大了免疫反应信号。 SARS-CoV-2重组刺突抗原的检出限为0.1 ng/mL，线性范围为0.2-100 ng/mL。此外，对假病毒的检测灵敏度可达360 TCID50/mL，与ELISA法相当。该条带特异性识别SARS-CoV2抗原，与其他冠状病毒或甲型流感亚型没有交叉反应。
实验方法
蛋白的表达与纯化：将C端带有6 × His标签的S蛋白cDNA在HEK293细胞中表达，3天后收获。
破碎细胞后先使用HisTrap HP column (Cytiva)进行粗纯，然后使用Superdex-200系列凝胶柱进行精细纯化，得到高纯度蛋白样品。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 预装柱 | 17524801 | HisTrap HP | 1 × 5 mL |
| 填料 | 17526801 | Ni Sepharose HP | 25 mL |
| 预装柱 | 28990944 | Superdex 200 Increase 10/300 GL | 1 × 24 mL |
