作者：Mehta J et al.
发表日期：2019年7月
发表期刊：Environmental Research
研究背景
有机磷农药 (OPP) 是目前全球使用最广泛（约 36%）的农药种类。 近几十年来，它们的过度使用引起了人们对食品和水供应安全的严重担忧。 由于OPP 会抑制乙酰胆碱酯酶 (AChE) 的活性，因此它们与人体接触会导致与神经、呼吸、消化和生殖系统相关的严重健康危害。 因此，借助快速、便携和使用友好的方法对 OPP 进行更常规的监测变得至关重要。
在农药的检测应用中，生物酶因其低成本、高效和环境友好而成为应用最广泛的识别分子。 目前，有大量酶生物传感器采用AChE抑制的原理。例如，有机磷酸水解酶OPH可以检测OPP中的methyl parathion。
金属有机框架 (MOF) 是晶体多孔材料，最近被推荐用于各种应用（例如吸附、分子分离、催化、药物递送、成像和化学传感），具有许多优点。 MOF 是非常有效的酶蛋白固定化底物，例如辣根过氧化物酶 (HRP)、牛血清白蛋白 (BSA)、微量过氧化物酶等。 MOF 的独特材料特性（例如，高表面积、可调孔隙率、内在或诱导功能，以及合成后修饰的可能性）使 MOF-酶复合材料具有高蛋白质负载、增强的活性、改善的稳定性和生物分子可重复使用的优点。
在本研究中，作者首次在锆-MOF（即 UiO-66-NH2）上共价固定了 OPH6His（His标签标记的OPH）。除此之外，由此产生的生物偶联物 (OPH6His/UiO-66-NH2) 可以作为分子载体，用于将甲基对硫磷催化转化为对硝基苯酚，然后通过简单添加荧光报告分子（即香豆素 ）即可用于荧光检测中。
实验方法
作者为了将酶固定的MOF与荧光染料偶联，首先需要制备6His标记的有机磷酸水解酶OPH，即 OPH6His。使用原核表达系统E. coli，并使用亲和层析Ni柱纯化。第二步是化学合成制备MOF (UiO-66-NH2)，并将OPH6His固定在MOF上。最后，对生物偶联物 (OPH6His/UiO-66-NH2)的检测功能进行验证。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 预装柱 | 17531901 | HisTrap FF | 5 × 1 mL |
| 填料 | 17531801 | Ni Sepharose 6 FF | 25 mL |
