作者：Caicheng Wang et al.
发表日期：2019年4月
发表期刊：Molecules

研究背景

抗真菌肽是植物防御系统的重要组成部分，分布在植物的果实、花、叶、块茎、胚根和种子中，其中源自种子的肽更常见。在本研究的早期阶段，我们不同植物种子粗蛋白提取物的抗真菌活性测定

甘蓝（Brassica oleracea var.gongylodes）种子的粗蛋白提取物表现出良好的对各种植物病原真菌的抗真菌活性。因此，在本研究中，我们并对科尔拉比种子提取物中的抗真菌肽进行了表征，研究了其抗真菌活性并研究了其对致病真菌的影响，旨在为进一步阐明抗真菌肽的作用机制并拓宽抗真菌肽作用的范围它的应用。

研究方法

150 g种子在1 L 10 mM NH4OAc, pH 4.6缓冲液中浸泡过夜，然后在4°C处摇晃放置12小时。离心，将所得上清经四层纱布过滤，收集滤液，得到粗提物。

首先，使用SP Sepharose 阴离子交换柱（5/16）捕获目标物。用10 mM NH4OAc, pH 4.6平衡阴离子柱后上样，用0.2 mol/L, 0.5 mol/L和 1 mol/L NaCl分级梯度洗脱，收集具有活性的洗脱峰。

将经SP Sepharose 阴离子交换柱纯化后得到的活性洗脱液用截留分子量为3.5 Kda的透析袋透析，透析后冷冻干燥，再重新溶解于10 mM NH4OAc, pH 4.6缓冲液中。上样到Mono S 5/50GL阳离子柱，用10 mM NH4OAc, 1 M NaCl, pH 4.6缓冲液线性洗脱，收集具有活性的洗脱峰。

最后将上一步纯化的有活性的洗脱峰透析换液，冷冻干燥后样品上样至Superdex peptide凝胶过滤进行精细分离。

产品信息

Reference
https://www.mdpi.com/1420-3049/24/7/1337