作者:Huifan Liu et al.
发表日期:2018年10月
发表期刊:International Journal of Peptide Research and Therapeutics
研究背景
在之前的一项研究中,从石斛中提取了一种粗肽提取物,这项研究的重点是肽级分(命名为DPP)经DEAE-Sepharose纯化后的表征。高纯度的DPP含有16种游离氨基酸和6种多肽。DPP可以作为AAPH自由基清除剂来保护红细胞氧化应激,肠道消化后衰减明显增加。此外Caco-2细胞模型的结果表明DPP的高吸收和转移速率,其中被动扩散是主要转移途径。通过LC-TOF/MS-MS分析,肽序列Asp-Asp-Asp-Tyr和Asp-Tyr-Asp-Asp对胃环境非常敏感,并被Caco-2细胞完全降解。而Ser-Ser-Arg-Ala-Val-Thr-Phe和Met-Leu-Cys-Ala抵抗胃状况;在随后的肠道消化和Caco-2细胞摄取后序列Met-Leu-Cys-Ala仍能保持其结构。
研究方法
铁皮石斛粗肽进行发酵和提取。
一般来说,选择解淀粉乳杆菌6(5×105-106菌落形成单位/g)在以下条件下发酵10g干茎:接种量,21%;材料与溶剂的比例,1:4(w/v);发酵时间46h;发酵温度37℃。充分干燥后,将样品在37°C下用200mL超纯水(1:20,w/v)水浴1小时。最后,通过冷冻干燥获得粗肽样品,随后在−20°C下储存直至使用。
将1g粗肽样品溶于100毫升超纯水。然后,将10mL该样品加载到DEAE-Sepharose Fast Flow色谱柱(1.6×35cm),流速为1mL/min,然后用0、0.5和1.5mol/L NaCl溶液洗脱。洗脱液在220nm处分析收集的级分。基于结果,DPP肽级分通过浓缩、透析和冷冻干燥
产品信息
类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
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预装柱 | 17505501 | HiTrap DEAE FF | 5 × 1 mL |
填料 | 17070910 | DEAE Sepharose FF | 25 mL |
Reference
https://link.springer.com/article/10.1007/s10989-018-9778-6