作者:Jiaojiao Mou et al.
发表日期:2017年1月
发表期刊:periodical (Journal name): International Journal of Biological Macromolecules
研究背景
几个世纪以来,海参一直被用作珍贵的食物来源和传统中药。从海参中提取的硫酸化多糖有两种,包括岩藻糖基化硫酸软骨素 (fCS)和岩藻聚糖。fCS是一种高度硫酸化的多糖,具有硫酸软骨素骨架和大量硫酸化岩藻糖支链。fCS潜在的治疗应用如抗肿瘤、抗病毒和抗血栓形成引起了人们的极大的研究兴趣。此外,fCS显示出类似肝素的抗凝活性,并与肝素相比,降低了出血风险。
本研究从海参H. mexicana (命名为HmG)中获得了一种新的fCS,建立了一种从海参中分离纯化fCS的简便有效的方法,并以1/2D NMR为主要分析方法对其详细结构进行了表征。另外降解制备了低分子量的HmG,以获得HmG的精确结构信息。此外,通过比较完整的HmG及其解聚产物的抗凝性能,阐明了结构-活性关系。
实验方法
干海参切碎、均质化后浸入丙酮中以去除脂质。加入胰酶后冷却、离心。向上清液中加入1倍 95% (v/v)乙醇得到沉淀并溶解。加入1.5 M KAc过夜离心收集得到粗多糖,溶于蒸馏水中透析,冻干。
粗多糖在Q Sepharose Fast Flow柱 (300 mm x 30 mm)上通过离子交换层析,用1.5 M NaCl洗脱收集多糖部分。透析后在Sephadex G10柱 (100 cm x 2.6 cm)上用蒸馏水进一步纯化。合并精纯的岩藻糖化硫酸软骨素多糖级分冻干后命名为HmG,H2O2降解HmG得到低分子量多糖DHmG。
获得的精纯多糖HmG用来做纯度,分子量,单糖组成,核磁和红外等分析,揭示多糖结构,并对HmG和DHmG两种分子量不同的多糖进行了抗凝血活性的测定并与肝素的药效进行比较。
产品信息
类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
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预装柱 | 11001303 | HiTrap Capto Q | 5 x 5 mL |
填料 | 17051010 | Q Sepharose Fast Flow | 25 mL |
填料 | 17531610 | Capto Q | 25 mL |
填料 | 17001001 | Sephadex G-10 | 100 g |
空柱 | 28988937 | Column XK 16/20 | 16/20 |