常见问题

Evaluation Classic 界面,打开想要分析的结果,在色谱图区域,右键单击 Customize… 弹出 customize :chrom.1 窗格,点选 Y-Axis ,切换到 Y-Axis 设置界面,在 Right Axis 选框的下拉选项当中选择您所需的右Y坐标即可,如图1所示。请注意,若此时图中没有显示该数据曲线,则需先在 customize :chrom.1 窗格中点击 Curve,切换至 Curve 设置界面,勾选需要分析的数据曲线,再去进行右Y的选择。

图1 Evaluation Classic模式下双Y坐标的设置

如想了解 Evaluation 中如何显示双Y坐标轴,请点击此链接

UNICORN™ 中的 Evaluation模块包含评估层析结果时所需的基本功能。经典的 Evaluation Classic 模块,功能更加全面,并需要单独的许可证。

相比于 Evaluation 模块,Evaluation Classic 模块拥有以下几个额外的功能,可在Evaluation 模块的 Help 界面 Evaluation vs. Evaluation Classic下找到,如下图1:

  1. Design of Experiments 功能,DoE 用于以系统的方式找出哪些运行参数影响要运行的流程,以及如何为这些参数找到最优值,以使用最少的运行次数获得更好的实验结果。
  2. Multi Result Peak Compare 功能,多结果峰图比较用于对不同结果的峰间进行统计比较,例如比较面积、保留率等。
  3. Evaluation procedures 功能,该功能用于记录和保存结果分析评估过程。该评估过程可以作为方法保存。当运行该方法时,分析评估过程将自动执行。
  4. Curve operations on the Operations menu 功能,即曲线操作菜单的多个曲线操作功能。 除了峰积分外,还可以执行一些操作。例如,应用数学运算来创建结果目标曲线,偏移保留/振幅以更好地可视化运行之间的差异,平滑曲线以减少噪声或创建直方图。
    注意: 移位偏移操作在Evaluation 模块中可用。

图 1 Evaluation Classic模块额外功能

您也可通过Cytiva官网UNICORN 7页面 UNICORN™ 7 | Cytiva (cytivalifesciences.com)下载查看 Evaluation Manual 手册查询详细信息。

备注:今后新添加的功能会基于 Evaluation,详情请查看官网说明。

Procedures 即结果批处理,可以用户自定义录制生成结果处理器,常用批处理包括曲线处理(曲线加减乘除与平滑,积分求导等)、曲线及峰表的导入与导出、数据导出及其他功能。

  1. 创建新的 Procedure
    工具栏点击 Procedure → New,弹出如下 Procedure Editor 对话框。
    点击工具栏 Control → Record 或单击 REC 图标开始录制,之后最小化 Procedure Editor 对话框并开始对结果按照步骤进行分析。分析结束后,恢复最小化的 Procedure Editor 对话框,点击工具栏 Control → End record 或单击停止图标 停止录制。点击工具栏选择 File → SaveFile → Save as 并在弹出的对话框中输入录制的 procedure 的名称 之后点击 OK。该 procedure 即可被保存并可供将来使用。

    REC 图标

    停止图标

    图1 创建新的 Procedure

  2. 运行已保存的 Procedure 程序
    点击工具栏 Procedures → Run on Multiple Chromatograms 。从列表中选择 procedure,然后单击 OK 。使用 Browse 按钮查找并选择相应的结果。在按住 Ctrl 的 同时单击鼠标按钮以选择多个项目。 单击 Run 按钮即可完成对所有选定的色谱图执行 Procedure 程序。

    图2 运行已保存的Procedure程序

可以。首先,点击图1工具栏的文件夹标识,在 Result Navigator中找到并双击打开目标实验结果。

图 1 打开实验结果

如图2所示,依次点击File > Report…

图 2输出结果报告

如图3所示,在弹出界面的 Format 中选择包含预输出内容的报告模板,也可以利用 New 按钮新建符合个性需求的报告,点击 Print…。弹出界面中选择 Adobe PDF/ Microsoft Print to PDF,输出PDF格式的文档。

图 3 生成结果报告

图 4选择PDF虚拟打印机

如想了解 Evaluation 中如何导出PDF报告,请点击此链接

UNICORN™能够打开同版本或更低版本的UNICORN™结果,反之不成立。例如UNICORN™ 7.0能够打开UNICORN™ 6.0的结果,但是不能打开UNICORN™ 7.6的结果。

电子签名以电子形式所含、所附用于识别签名人身份并表明签名人认可其中内容的数据。

使用方法:如需对结果进行签名,点击 File → Sign Result…,在弹出的对话框的 Sign result 选项框中之后输入相应的信息之后点击 OK 即可完成签名。对话框显示了目前的用户信息,也可以选择其他用户。如果选择了新的用户名必须输入相应的用户密码。

注意:Lock是默认勾选的状态,会将结果锁定避免其他修改。

UNICORN™结果可以以多种格式进行导出,可导出格式及操作方法如下:

  1. 导出结果图片
    如需将分析结果以图片形式导出,可在曲线窗口中点击右键,点击 Copy to Metafile,之后选择图片保存的位置及名称,点击 Save 保存即可。

    图1 导出结果图片

  2. 导出原始数据
    运行结果可以以原始数据形式导出,导出的原始数据为.zip格式,仅能用UNICORN™软件打开,原始数据文件中包含了实验过程所有的信息,包括方法信息、运行记录等。如需导出原始数据,点击工具栏 File → Export → To UNICORN → Entire Result,之后在弹出的对话框选择保存的位置和名称,点击 Save 执行即可。

    图2 导出原始数据

  3. 导出曲线数值
    如需导出色谱图数值自己作图,可以点击工具栏 File → Export → Externally → Curves,在弹出的窗口中勾选需要导出数据的曲线,点击 Select,勾选后点击 Export,在弹出的对话框中选择数据存储路径、文件名,点击 Save ,曲线数值数据即可保存为.asc格式文件,该文件可用 Excel 等软件打开。

    图3 导出曲线数值

  4. 生成报告
    运行结果可以直接打印或导出报告,具体操作方法为,点击工具栏 Report 图标 ,弹出的 Generate Report 对话框选择需要导出的报告格式并点击 Preview 预览。此时弹出 Customize Report 界面,如下图,如希望对 Report 的格式进行编辑,也可以点击该界面 Edit Mode 选项,对格式进行编辑完成报告的编辑后,可点击工具栏 File → Save as PDF 保存。如电脑有连接打印机,也可以点击 File → Print 打印报告。

    Report图标

    图4 生成报告

如想了解 Evaluation 中如何导出实验结果,请点击此链接

如图1所示,打开待对比的层析图谱,点击 Browse…,选择待对比结果所在路径,依次点击 Search → Select All → OK 打开待对比图谱,待对比结果如图2所示

图 1 Evaluation Classic 层析图谱对比

图 2 Evaluation Classic 层析图谱对比结果

如图3,依次点击工具栏 View → Tile All Chromatograms,可将两个色谱图显示在同一窗口中进行比较,结果如图4所示。

图 3 同一窗口显示待对比图谱

图 4 同一窗口的待对比图谱

如想了解 Evaluation 中如何对比不同结果文件的层析图谱,请点击此链接

如图1所示,按照顺序点击命令,Open → Result Navigator Crtl+O 打开一个层析结果,如图2所示。

图 1 打开Result Navigator并选中要比较的层析结果

图 2单个结果目标曲线

如图3所示,依次点击工具栏 File → Open to Compare → Curves…,在弹出的对话框中点击 Browse… 寻找需要比对的结果,在 Curve Selection 中选择待比较的曲线,并依次点击 Search → Select All 选中曲线,如图4。

图3 打开需要对比曲线的文件

图4选择多图谱曲线

Curve options 中选择待比较曲线显示的方式,点击 OK 完成曲线对比,结果如图5所示。

图 5 Evaluation Classic层析结果曲线比较

如想了解 Evaluation 中如何对比不同结果文件的曲线,请点击此链接

蛋白的消光系数可通过各种工具网站计算得到,如ExPASy(https://web.expasy.org/protparam/

使用UNICORN™软件时,对于有收集操作的结果文件,可在 Evaluation Classic 界面中执行 Operation → Fraction Histogram…,在 Ext. coef. 选项下输入消光系数(Ext.coef.),即可自动计算蛋白含量(Amount)和浓度(Conc.),具体步骤如图1所示:

图 1 Evaluation Classic自动计算蛋白浓度

如想了解 Evaluation 中如何根据消光系数计算各组分的蛋白含量及浓度,请点击此链接

  1. 在包含实验结果的一台电脑上启动UNICORN™软件打开 Evaluation Classic 窗口,打开一个需要导出报告的实验结果。点击 File → Report… 或点击工具栏上的 Report 图标;

    图 1生成报告

  2. 在弹出 Generate Report 窗口可以选择不同的报告格式。比如希望导出仅含层析图谱的报告可以选择 Chromatogram;希望导出含层析图谱及运行日志 Run Log 的报告可以选择 Chromatogram including logs 等;

    图 2选择生成报告的格式

  3. 选择好格式后可以选择 Print… 直接打印报告,或 Preview… 预览报告。在预览状态下可以选择 File → Save as PDF… 将报告导出;

    图 3 保存为PDF文件导出报告

  4. 如有希望输出的格式进行个性化调整,可以在工具栏点击 Edit Mode 完成;

    图 4 编辑模式

  5. Edit Mode 窗口下,点击Edit → Page Setup 可以进行页面版式的调整;

    图 5 页面版式的调整

  6. 点击 Insert,可以插入文字,图谱,方法文本,运行日志等进行报告内容的调整。还可以点击工具栏的 Add PageDelete Page 来增加和删除报告页数;

    图 6 报告内容的调整

  7. 调整好报告格式后,点击 Preview 回归预览界面,选择 File → Save as PDF 对调整后的报告导出或 File → Print 打印报告。

    图 7 调整格式后导出报告

需要在 Evaluation Classic 界面右键 Customize → X-Axis,勾选并在 Adjust retention zero injection number 选择需要的第n次上样,第n次上样坐标即为横坐标。

图1 横坐标设置

在Evaluation Classic界面,打开想要分析的结果,在色谱图区域,右键单击Customize…弹出customize :chrom.1 窗格,取消或选中要显示的曲线名称,如图1:


图1 选择自定义曲线名称

点选Curve Style and Color,切换设置界面,即可在此设置想要显示的曲线类型和图例,如图2所示。此处以仅显示紫外曲线为例介绍:Select curve to modify color and linestyle for:选中1 UV 1_280_ Chrom.1:xiangjie empty loop with 002,然后设置对应的Color 和Line style。


图2 Evaluation Classic模式下显示曲线和图例的设置

然后选中Layout Library窗格,点击Save Current Layout As…,在弹出的对话框Save Layout中将当前的显示保存想要的显示名称,可选为全局(Global)模式和当前用户(Personal)两种模式。若要将所有的结果均显示成此种显示模式,请勾选Save as default。


图3 Evaluation Classic模式下自定义显示曲线和图例的保存

注意:Apply to all chromatograms是当前结果存在多个色谱图时,可将此应用到所有色谱图。

最终打开结果显示如图4,可切换至其他结果查看默认显示曲线和图例,此设置对一台电脑控制多台UNICORN的其他账号无效(即仅对当前用户有效)且已修改并保存过的结果无效。


图4 Evaluation Classic模式下自定义显示曲线示例