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mRNA下游纯化工艺的优化
作者使用抗流感病毒IgG作为模式抗原,探讨研究了mRNA下游纯化相关工艺参数的优化。由于质粒DNA的纯化已经建立了较为成熟的平台工艺,在本文中作者未讨论相应内容。
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FPLC 快速纯化体外转录的RNA寡核苷酸
RNA 通常从 DNA 模板进行体外转录来制备。转录后用变性 PAGE 胶的方法分离 RNA 。虽然这种方法是成功的,但它有几个缺点:需要多天来纯化单个 RNA 样品
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凝胶过滤层析纯化和鉴定体外转录的RNA
RNA的生物物理和结构研究通常需要毫克量的纯物质。大于20—30 nt 的RNA分子的大规模化学合成在技术上任是困难且昂贵的。
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强阴离子交换FPLC是体外转录产生的RNA制备纯化的一个通用工具
RNA相关研究通常需要纯RNA进行结构和生化研究。对于RNA生成,体外转录通常是首选方法,而不是过表达,因为难以维持细胞内产生的RNA的稳定性。
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弱阴离子交换FPLC快速纯化非变性RNA
RNA在基因表达的转录后调节的核心作用已经明确。生化和结构研究所需的毫克量的RNA,可以通过使用高分辨率快速高效液相色谱 (FPLC) 系统,基于大小排阻进行纯化。